محیط کشت  TSA &#۸۲۱۱; تریپتیک سوی آگار

محیط کشت تریپتیک سوی آگار یا همان محیط کشت TSA یک محیط کشت آماده مصرف، عمومی و غیر انتخابی است. خرید محیط کشت TSA به صورت پلیت‌ های ۸ سانتی‌ متری و روداک پلیت در فروشگاه نیکو به صورت آنلاین انجام می‌ شود.  این بدان معناست که این محیط کشت برای رشد طیف وسیعی از میکروارگانیسم‌ها (گرم مثیت و منفی)، به ویژه باکتری‌ های هوازی و بی‌ هوازی اختیاری، طراحی شده است و معمولا برای جداسازی، خالص‌ سازی، شمارش و مطالعات اولیه میکروبی به کار می‌رود.

محیط کشت TSA  به دلیل فراهم کردن مواد مغذی غنی و متعادل، انتخابی ایده‌ آل است که از آزمایشگاههای کنترل کیفیت صنایع غذایی، دارویی و آرایشی بهداشتی گرفته تا آزمایشگاههای تحقیقاتی و تشخیصی بالینی از آن استفاده میکنند. این محیط کشت پایه و اساس بسیاری از روشهای استاندارد میکروبیولوژیکی است.

ترکیبات محیط کشت  TSA

فرمولاسیون محیط کشت تریپتیک سوی آگار به گونه ‌ای طراحی شده است که نیازهای غذایی بسیاری از باکتری‌ ها را برآورده سازد. ترکیبات اصلی آن عبارتند از:

1. پپتون (تریپتون): این ماده که از هضم آنزیمی کازئین (پروتئین شیر) یا سایر منابع پروتئینی به دست می‌آید، منبع اصلی نیتروژن آلی، اسیدهای آمینه و پپتیدهای کوچک است. این ترکیبات برای سنتز پروتئین‌ها و رشد سلولی باکتری‌ها ضروری هستند.
2. عصاره مخمر : (Yeast Extract) منبع غنی دیگری از ویتامین‌ها (به ویژه گروه (B ، مواد معدنی، اسیدهای آمینه و کربوهیدرات‌ها است. این مواد به عنوان فاکتورهای رشد عمل کرده و به بهبود نرخ رشد و توانایی باکتری‌ها در متابولیسم کمک می‌کنند.
3. سدیم کلرید: (NaCl) برای حفظ فشار اسمزی متعادل در محیط کشت استفاده می‌شود و از لیز شدن یا چروکیده شدن سلول‌های باکتریایی جلوگیری می‌کند.
4. آگار: (Agar) این پلی‌ساکارید طبیعی استخراج شده از جلبک‌های دریایی، به عنوان عامل جامد کننده عمل می‌کند. آگار در غلظت‌های معمول (۱.۵٪ تا ۲٪) محیط کشت را جامد می‌کند و امکان رشد کلنی‌های منفرد و قابل مشاهده را فراهم می‌آورد، بدون اینکه توسط اکثر باکتری‌ها متابولیزه شود.
5. آب مقطر: حلال اصلی برای تمامی ترکیبات و بستر واکنش است.این ترکیبات در کنار هم، یک محیط کشت غنی و متعادل را ایجاد می‌کنند که قادر به حمایت از رشد طیف وسیعی از باکتری‌ها، از جمله باکتری‌های سخت‌رشدتر، می‌باشد.

کاربرد محیط کشت TSA

خرید محیط کشت TSA یا همان تریپتیک سوی آگار به صورت آنلاین در فروشگاه نیکو میتوانید انجام دهید.

• جداسازی و خالص‌ سازی کلنی‌ها: محیط کشت تریپتیک سوی آگار بستری عالی برای جداسازی باکتریهای مختلف از یک نمونه مخلوط است. با کشت نمونه بر روی سطح محیط  می‌توان کلنی‌ های منفرد و خالص از یک سویه باکتری خاص را به دست آورد.
• شمارش میکروبی : (Total Viable Count) در صنایع غذایی، دارویی و آب، شمارش تعداد باکتری‌های زنده در نمونه‌ها بسیار حائز اهمیت است. پلیت‌های TSA امکان شمارش کلنی‌های تشکیل شده را پس از انکوباسیون فراهم می‌کنند.
• آزمایش‌های کنترل کیفیت: در صنایع مختلف، TSA به طور منظم برای نظارت بر بار میکروبی محصولات و اطمینان از عدم وجود عوامل بیماری‌زا استفاده می‌شود.
• آماده‌سازی برای تست‌های حساسیت آنتی‌بیوتیکی: قبل از انجام تست دیسک دیفیوژن، سویه‌های باکتریایی ابتدا بر روی سطح محیط TSA کشت داده می‌شوند تا یک لایه یکنواخت از باکتری‌ها (lawn) ایجاد شود.
• تحقیقات میکروبیولوژی پایه: TSAبه عنوان یک محیط پایه برای مطالعات مختلف در زمینه فیزیولوژی باکتریایی، متابولیسم و ژنتیک میکروبی استفاده می‌شود.
• کشت میکروارگانیسم‌های نشانگر: در برخی موارد، تریپتیک سوی آگار برای رشد میکروارگانیسم‌های خاصی که به عنوان نشانگر وجود آلودگی یا شرایط خاص محیطی عمل می‌کنند، به کار می‌رود.

ویژگیهای محیط کشت TSA

سوالات متداول

۱.  محیط کشت TSA چیست و چه تفاوتی با محیطهای مشابه مثل SDA دارد؟

تریپتیک سوی آگار یک محیط خنثی (pH ~7.3) و غنی از پپتون و عصاره مخمر است که برای رشد سریع و عمومی انواع باکتریهای هوازی و بی‌ هوازی اختیاری طراحی شده. اما SDA یک محیط  کشت اسیدی (pH ~5.6) با غلظت بالای دکستروز است. این pH پایین، رشد باکتری‌ ها را مهار کرده و رشد قارچ‌ ها و مخمرها (مانند کاندیدا و آسپرژیلوس) را تقویت می‌کند. به زبان ساده TSA غذای باکتری‌ هاست، SDA  غذای قارچ‌ ها.

۲. آیا TSA برای کشت قارچ‌ها مناسب است؟

خیر، TSA برای باکتری‌ها بهینه است. برای قارچ‌ها معمولا از محیط‌های مخصوص مانند سابورو دکستروز آگار (SDA) استفاده می‌شود.

۳. پلیت‌های TSA را چگونه باید نگهداری کرد؟

پلیت‌ها را در یخچال (دمای ۲-۸ درجه سانتی‌گراد) و دور از نور مستقیم نگهداری کنید. پلیت های ۸ سانت میتوانند گزینه ای مناسب جهت نگهداری این محیط کشت باشند.

۴. پس از باز کردن بسته‌بندی، پلیت‌ها تا چه مدت قابل استفاده هستند؟

پس از باز کردن بسته، پلیت‌ها را در بسته‌بندی اولیه یا کیسه پلاستیکی دربسته در یخچال نگهداری کنید و حداکثر تا ۲ هفته مصرف نمایید. از قرار دادن پلیت‌ها در معرض هوای آزاد خودداری کنید.

۵. چرا گاهی کلنی‌ها روی TSA تغییر رنگ می‌دهند؟

محیط کشت TSA معمولاً فاقد اندیکاتور pH است. تغییر رنگ ممکن است به دلیل تولید رنگدانه توسط خود باکتری (مانند سودوموناس) یا آلودگی محیط باشد.

۶. آیا می‌توان از تریپتیک سوی آگار برای کشت نمونه‌های بالینی (خون، ادرار) استفاده کرد؟

بله، اما برای تشخیص بالینی معمولاً از محیط‌های انتخابی (مانند مک کانکی یا بلاد آگار) استفاده می‌شود